Ette Glukozun HPLC ile Belirlenmesinde Azalan Elüsyon Tekrarlanabilirliğine Alternatif Yaklaşım


Dursun A., Güler Z.

14. Gıda Mühendisliği Kongresi, Antalya, Türkiye, 13 - 15 Kasım 2025, (Özet Bildiri)

  • Yayın Türü: Bildiri / Özet Bildiri
  • Basıldığı Şehir: Antalya
  • Basıldığı Ülke: Türkiye
  • Hatay Mustafa Kemal Üniversitesi Adresli: Evet

Özet

Bu çalışmada, glukoz tayininde yaygın olarak kullanılan HPLC metodu (10 mM H2SO4, 0.6 mL/dk akış, 60 oC) ile tekrarlanabilirliğin zamanla azalması durumunda alternatif elüsyon koşullarıyla (25 mM H2SO4, 0.2 mL/dk akış, 40 oC) tekrarlanabilirlik değerlendirilmiş ve her iki elüsyon koşullarının performansları karşılaştırılmıştır. Sığır etinde glukoz, Aminex HPX87H kolonunda (300×7.8 mm) analiz edilmiş ve refraktif indeks dedektörü ile belirlenmiş olup, gün içi (n=12) ve günler arası (n=24) tekrarlanabilirlik için relatif standart sapma (RSD) hesaplanmıştır. Yaygın metot ile glukoz pikinin 1. günde alıkonma zamanı 8.62 dakika (RSD: %0.40), teorik plak sayısı 3963 (RSD: %21.1) ve rezolüsyon 0.78 (RSD: %4.05) olarak belirlenmiştir. Ancak 2. günde teorik plak sayısı 820’ye (RSD: %38.6; P < 0.001) ve rezolüsyon 0.47’ye (RSD: %14.1; P < 0.001) düşerek elüsyonda azalma gözlemlenmiştir. Alternatif elüsyon koşullarının uygulanması durumunda, glukoz daha uzun sürede (27.5 vs 8.61; P < 0.001) alıkonarken, ortalama teorik plak sayısı (11176 vs 2392; P < 0.001), kuyruklanma faktörü (0.86 vs 0.80; P < 0.05) ve rezolüsyon (0.76 vs 0.63; P < 0.001) daha yüksek tespit edilmiştir. Ayrıca, yaygın metotla karşılaştırıldığında, alternatif elüsyonla belirlenen relatif standart sapma değerlerine göre alıkonma süresi (sırasıyla 0.30 ve 0.04), teorik plak sayısı (71.9 ve 1.83), kuyruklanma faktörü (12.4 ve 5.98) ve rezolüsyon (27.2 ve 4.49) daha düşük varyasyon göstermiştir. Sonuç olarak, düşük taşıyıcı konsantrasyonlu (10 mM H2SO4) ve yüksek taşıyıcı akış hızı (0.6 mL/dk) ve kolon sıcaklığında (60 oC) glukoz belirlemede tekrarlanabilir elüsyon sağlanamadığı durumda her ne kadar daha uzun analiz süresi gerekse de alternatif olarak yüksek taşıyıcı konsantrasyonu (25 mM H2SO4) ve düşük akış hızı (0.2 mL/dk) ve kolon fırın sıcaklığı (40 oC) uygulaması ile tekrarlanabilir ve verimli bir elüsyon sağlanabilir.