Glikoz açlığının A549 ve beas-2B hücre hatlarında hücre canlılığı parametrelerine olan etkisi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Hatay Mustafa Kemal Üniversitesi, SAĞLIK BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ, MOLEKÜLER BİYOKİMYA VE GENETİK (DR), Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2019
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: BÜŞRA GİZEM ÇETİNER
Danışman: MENDERES YUSUF TERZİ
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Kanser hücreleri artan glikoz kullanımı ile karakterize, metabolik değişim geçirmiş hücrelerdir. Kanser hücrelerinin metabolizmasını anlamak, kanser tedavisinde oldukça büyük önem arz etmektedir. Çalışmamızın amacı, glikoz açlığının sağlıklı ve kanser hücrelerinde, hücre canlılığı parametreleri üzerindeki etkilerini belirleyerek, kanser tedavisini desteklemektir. Çalışmamızda; MTT testi ile 8, 16 ve 24 saatlik açlığın hücre canlılığına etkisi araştırıldı ve ileriki deneyler için 8 ve 24 saatlik açlık süreleri seçildi. Açlık süreleri sonucu; hücre canlılığı, hücre döngüsü, kuisens, senesens, apoptoz ve otofaji yolaklarında görevli mTOR, p21, kaspaz 3, beclin 1 ve ATG12 genlerinin ekspresyon seviyeleri qRT-PCR yöntemi ile belirlendi. Hücrelerde senesens olayı SA-β-Gal boyama ile görüntülendi Sonuçlarımız, açlığın kanser ve sağlıklı hücrelerde canlılığı düşürdüğünü göstermiştir. Ancak, BEAS-2B'den farklı olarak A549 kanser hücrelerinde açlık süresinin artışı hücre canlılığını önemli ölçüde düşürdü. SA-β-Gal boyama sonucu, 8 ve 24 saatlik açlıkta A549 hücresinde BEAS2B'ye göre daha fazla senesent hücre saptadık. Her iki hücre hattında artan açlık süresi ile p21 ekspresyon seviyesi artmış, hücre döngüsünü engellemiştir. MTT analizi ve SA-β-Gal boyama sonuçları göz önüne alındığında, kanser hücrelerinde açlığa bağlı hücre döngüsü inhibisyonunun sağlıklı hücrelere kıyasla daha fazla olduğu söylenebilir. Senesens profili kanser hücrelerinde 8 saat açlıkta artan mTOR ekspresyonu ile desteklenmiştir. mTOR mRNA seviyesi 8 saat açlıkta BEAS-2B hücrelerinde azalırken, 24 saat açlıkta artış göstermiştir. Otofajide, 8 saatlik açlıkta A549 hücresinde beclin 1 ekspresyonu artarken, BEAS-2B hücresinde azalmıştır. 24 saatlik açlıkta ise iki hücre hattında da ATG12 artışıyla otofaji tetiklenmiştir. Her iki hücre hattında 24 saat açlıkta apoptotik markır kaspaz 3'te artış görülmüştür. Fakat kaspaz 3'teki bu kat artışı sağlıklı hücrelere kıyasla kanser hücrelerinde daha fazladır. 8 saatlik açlıkta ise BEAS2B hücrelerinde kaspaz 3 değişmemiştir. Sonuç olarak bu çalışmamızda, artan glikoz açlığı süresi ile beraber sağlıklı ve tümör hücrelerinin hücre canlılığı parametrelerinin olumsuz yönde etkilendiğini gözlemledik. Sonuçlarımız, glikoz açlığının kanser hücrelerinde, sağlıklı hücrelere kıyasla daha olumsuz etkilere sahip olduğunu göstermektedir