Hidrojen peroksit ile oksidatif strese uğratılmış beas 2b hücre hattında myrtus communis L. yağının antioksidan etkisinin araştırılması


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Hatay Mustafa Kemal Üniversitesi, SAĞLIK BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ, MOLEKÜLER BİYOKİMYA VE GENETİK (DR), Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2019

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: HAYRİYE ZEHRA ULUTAŞ

Danışman: GÜLAY GÜLBOL DURAN

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu çalışmada, Myrtus Communis L.(MC)esansiyel yağının,in vitro olarak hidrojen peroksit ile oksidatif strese uğratılmış insan bronşiyal epitel hücre hattında (BEAS-2B) antioksidan etkilerinin olup olmadığı, apoptotik yolakları tetikleyip tetiklemediği, tetikliyorsa hangi apoptotik yolak üzerinden düzenlendiği araştırılmıştır. BEAS-2B hücreleri,oksidatif stres modeli oluşturmak için uygun dozunbelirlenmesine yönelik24 saat süreyle 0, 30,40, 50, 75, ve 100µM H2O2'ye maruz bırakıldı. MTT yöntemiyle hücre canlılığı analiz edildi. 40µM H2O2 ileMC yağının 1000-500-250-125-62.5-31.25-15.625 g/ml dozları 24 saat süreyle inkübe edilip MTT yöntemi ile 15,625µg/ml'nin sitotoksik olmayan doz olduğu tespit edildi. Bu dozlarda oksidatif stres durumu ve apoptotik yolakta görevli Kaspaz 3, Kaspaz 8, Kaspaz 9 ile p21 gen ekspresyonları analiz edilerek sonuçları değerlendirildi. Kontrol grubu olarak H2O2 maruziyeti uygulanmayan sağlıklı hücre grubuyla karşılaştırıldığında, 40µM H2O2 maruziyeti uygulanan grupta MDA düzeyinde anlamlı bir artış gözlenirken (p=0,0005), MC esansiyel yağı ile tedavi edilen gruptaki MDA düzeyi kontrol grubu ile benzer düzeyde (p>0.05) bulunmuştur. MC esansiyel yağı ile tedavi edilen grup, H2O2 maruziyetine uğratılmış ile grup ile karşılaştırıldığında MDA düzeyinde anlamlı bir azalmasaptanmıştır (p=0,2717). 24.saatte 40 µM H2O2maruziyeti uygulanan hücrelerde Kaspaz 3, Kaspaz 8 ve p21 genlerinin ekspresyon seviyelerinin sağlıklı hücre grubuna göre anlamlı bir şekilde arttığı (sırasıyla p=0.001, p=0.017 ve p=0,0003),Kaspaz 9 gen ekspresyon seviyesinin değişmediği (p=0.8) saptanmıştır. MC yağı ile tedavi edilen hücrelerde, oksidatif stres modelinin oluşturulduğu gruba göre p21, Kaspaz 8 ve Kaspaz 9 gen ekspresyon seviyelerinde bir değişiklik gözlenmezken (p>0.05), Kaspaz 3 gen ekspresyon seviyesinde anlamlı şekilde azaldığı saptanmıştır (p=0.00007). Çalışmamızda, MC esansiyel yağının 15,625µg/ml dozda oksidatif stres üzerinde MDA seviyesini güçlü şekilde azaltıcı etkisi olduğu, ayrıca aynı dozda Kaspaz 3 gen ekspresyonun azaltılması ile apoptozu durdurucu bir etki göstererek, teröpatik ajan olarak potansiyeli olduğu gösterildi. Sonuç olarak MC yağınıngüçlü bir antioksidan etkiye sahip olduğu, oksidatif stresten kaynaklanan apoptozisin geri çevirilmesinde de etkili olduğu düşünülmektedir.