Önemli Kiraz Yetiştiriciliği Yapılan İllerde Kirazlardaki Fitoplazmaların Vektörlerinin ve Endofit Bakterilerin Belirlenmesi


Creative Commons License

Bozkurt A., Çağlayan K., Başpınar H., Kaya K., Gazel M.(Yürütücü)

TÜBİTAK - AB COST Projesi , 2014 - 2017

  • Proje Türü: TÜBİTAK - AB COST Projesi
  • Başlama Tarihi: Mayıs 2014
  • Bitiş Tarihi: Mayıs 2017

Proje Özeti

Türkiye’ de kiraz ağaçlarında fitoplazmalar ile ilgili çalışmalar çok sınırlı olup, vektörleri ve endofit bakteri türler konusunda hiç bir çalışma yürütülmemiştir. Bu çalışmada, İzmir, Manisa, Afyon, Uşak, Adana ve Kahramanmaraş illerinde yetiştirilen kiraz ağaçlarındaki fitoplazmaların varlığının PCR-RFLP ve nükleotid dizi analizleri ile belirlenmiş, fitoplazma ile enfekteli kiraz bahçelerinden ve çevredeki doğal ot populasyonundan toplanan olası vektör adayı böcekler teşhis edilerek moleküler yöntemlerle böcek bünyesinde fitoplazma varlığı araştırılmış, hem fitoplazma hem de böceklerin konukçusu durumunda olan yabancı otlarda fitoplazmaların varlığı belirlenmiş, vektör böceklerle taşıma denemeleri yapılmış ve kiraz ağaçlarında sorun oluşturan fitoplazmalarla yeni kontrol stratejilerinin geliştirilmesine destek sağlayabilecek aday endofitik bakteri türleri saptanmıştır. Bu çalışmada kiraz ağaçlarında gözlenen en yaygın simptomlar sararma, kısmi dal kurumalaru, aşırı sürgün oluşumu, dalların uçlarında çıplaklaşma, az sayıda yaprak ve meyve oluşumu olmuştur. Kiraz bahçelerinde bulunan yabancı otlarda ise mozaik, sararma ve damar bantlaşma simptomları gözlenmiştir. Yapılan arazi çalışmaları sonucunda toplam 298 kiraz, 32 vişne ve 20 yabancı ot örneği alınmıştır. Toplanan 298 adet kiraz örneğinden 7 adedinde fitoplazma saptanırken (%2.34), vişne ve yabancı ot örneklerinde fitoplazma saptanamamıştır. Kiraz bahçelerinden toplanan toplam 1580 adet Cicadellidae familyasına ait böcekten 259 tanesi fitoplazma pozitif saptanmış olup böcek bünyesinde fitoplazma enfeksiyon oranı %16,39 olarak belirlenmiştir. Doğu Akdeniz Bölgesi’nden toplanan Triozidae ve Homotomidae familyalarına ait 46 bireyin teşhisleri yaptırılmıştır. Taşıma denemesi kurulan 25 adet kiraz bitkisinin 12 adedinin fitoplazma ile enfekteli olduğu saptanmıştır. Taşıma denemesinde kullanılan Cicadeliid böceklerin bünyesinde fitoplazma enfeksiyon oranı %18,20 olarak belirlenmiştir. Araziden toplanan örneklerden fitoplazma ile enfekteli olduğu tespit edilen örneklerin P1P7 primerini takiben fU3/fU5 üniversal primeri kullanılarak yapılan nested-PCR ürünlerinin RsaI ve SspI restriksiyon endonükleazlarla kesilmesi ile Ca. P. prunorum, Ca. P. mali ve Ca. P. pyri infeksiyonları teyid edilmiştir. Sekans analizi yapılan fitoplazma izolatlarının Gen Bankasındaki izolatlarla karşılaştırılması sonucu %99’luk bir benzerlik oranı elde edilmiştir. Fitoplazma ile enfekteli ve sağlıklı kiraz ağaçlarından endofitik bakteriler izole edilmiş ve izolatlar FAME yöntemi ve MALDİ-TOF ile tanılanmıştır. Sekans analizi yapılan bakteri izolatlarının Gen Bankasındaki izolatlarla karşılaştırılarak benzerlik oranları belirlenmiştir.